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一種重組蕎麥谷氧還蛋白及其制備方法和應(yīng)用

發(fā)明專利有效專利
  • 申請(qǐng)?zhí)枺?/span>
    CN201610536725.1
  • IPC分類號(hào)：C12N9/02;C12N15/53;C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12R1/19
  • 申請(qǐng)日期：
    2016-07-08
  • 申請(qǐng)人：
    山西大學(xué)
著錄項(xiàng)信息
專利名稱一種重組蕎麥谷氧還蛋白及其制備方法和應(yīng)用
申請(qǐng)?zhí)?/td>CN201610536725.1申請(qǐng)日期2016-07-08
法律狀態(tài)授權(quán)申報(bào)國(guó)家中國(guó)
公開/公告日2016-11-16公開/公告號(hào)CN106119217A
優(yōu)先權(quán)暫無(wú)優(yōu)先權(quán)號(hào)暫無(wú)
主分類號(hào)C12N9/02IPC分類號(hào)C;1;2;N;9;/;0;2;;;C;1;2;N;1;5;/;5;3;;;C;1;2;N;9;/;1;0;;;C;1;2;N;1;5;/;5;4;;;C;1;2;N;1;5;/;7;0;;;C;1;2;R;1;/;1;9查看分類表>
申請(qǐng)人山西大學(xué)申請(qǐng)人地址
山西省太原市小店區(qū)塢城路92號(hào) 變更 專利地址、主體等相關(guān)變化，請(qǐng)及時(shí)變更，防止失效
權(quán)利人山西大學(xué)當(dāng)前權(quán)利人山西大學(xué)
發(fā)明人王宏飛;張新瑀;王文明;王轉(zhuǎn)花
代理機(jī)構(gòu)山西五維專利事務(wù)所（有限公司）代理人張福增
摘要
本發(fā)明提供了一種重組蕎麥谷氧還蛋白及其制備方法和應(yīng)用。制備方法：將重組蕎麥谷氧還蛋白(rbGrx)基因構(gòu)建到pGEX?6p?1載體上，轉(zhuǎn)化到大腸桿菌BL21(DE3)中，誘導(dǎo)表達(dá)連接有GST的融合蛋白；酶切后使用陰離子交換柱與凝膠柱進(jìn)一步純化，獲得純度98％以上的重組rbGrx蛋白。進(jìn)而在pH4.5，22％PEG3350(W/V)和0.1MCH3COONa的結(jié)晶化條件下,培養(yǎng)獲得rbGrx蛋白與谷胱甘肽(GSH)復(fù)合物晶體，并利用X射線單晶衍射的方法測(cè)定其結(jié)構(gòu)，可清晰分辨出與催化活性相關(guān)的重要氨基酸殘基，從而可以有目的地調(diào)控其穩(wěn)定性及酶的活力。本發(fā)明重組蕎麥谷氧還蛋白具有高的巰基轉(zhuǎn)移酶活性，酶比活力為300U/mg。其可在催化巰基轉(zhuǎn)移反應(yīng)中應(yīng)用，其晶體及其結(jié)構(gòu)在醫(yī)療保健和食品開發(fā)等方面也具有實(shí)用價(jià)值。

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