一種病毒免疫型誘導(dǎo)劑及其應(yīng)用

1.一種草莓脫毒種苗病毒免疫型誘導(dǎo)劑，所述的病毒為草莓斑駁病毒，草莓皺縮病毒、草莓輕型黃邊病毒、草莓鑲脈病毒，其特征在于，包括如下重量份的原料組成：黃芪多糖?32?份，綠原酸?26?份，丹參總酮?26?份，益母草堿?16?份。

一種病毒免疫型誘導(dǎo)劑及其應(yīng)用\n技術(shù)領(lǐng)域\n[0001] 本發(fā)明涉及一種植物病毒免疫誘導(dǎo)劑及在草莓脫毒免疫誘導(dǎo)上的應(yīng)用，屬于植物病毒免疫誘導(dǎo)技術(shù)。\n背景技術(shù)\n[0002] 草莓在自然界種植的過程中容易感染多種病毒，使自然繁育的后代性狀先天不良，主要表現(xiàn)在抗性、產(chǎn)量和品質(zhì)退化，通常感染的病毒有四種，即草莓斑駁病毒、輕型黃邊病毒、鑲脈病毒和皺縮病毒。近年來，對草莓進(jìn)行脫毒處理已是成熟技術(shù)。草莓脫毒種苗雖然不帶病毒，但在自然界種植過程中還是容易受到病毒侵害，種苗植株對病毒的主動(dòng)免疫力不足，感染病毒后會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)量和品質(zhì)的下降。因此對不帶病毒的脫毒種苗進(jìn)行免疫誘導(dǎo)，使草莓種苗本身含有抗病毒免疫因子，從而對病毒具有主動(dòng)免疫力很有必要。\n發(fā)明內(nèi)容\n[0003] 本發(fā)明的目的在于提供一種病毒免疫型誘導(dǎo)劑，具體包括如下重量份的原料組成：黃芪多糖25-35份，綠原酸20-35份，丹參總酮20-35份，益母草堿12-22份。\n[0004] 進(jìn)一步優(yōu)選為黃芪多糖32份，綠原酸26份，丹參總酮26份，益母草堿16份。\n[0005] 所述的黃芪多糖還可以替換為包括黃芪多糖在內(nèi)的魔芋葡甘聚糖、白術(shù)多糖、香菇多糖、竹葉多糖、女貞子多糖、麻黃多糖中的一種或多種。\n[0006] 所述的丹參總酮還可以替換為包括丹參總酮在內(nèi)的蒲黃酮、三七總皂苷、竹節(jié)皂苷中的一種或多種。\n[0007] 綠原酸還可以替換為原兒茶酸或表沒食子酸或經(jīng)滅菌后的腐殖酸。\n[0008] 所述的益母草堿還可以替換為包括益母草堿在內(nèi)的麻黃生物堿、茶多酚、苦草堿中的一種或多種。\n[0009] 該病毒免疫型誘導(dǎo)劑還包括以所述的原料的組合物為主要成分，經(jīng)添加凝膠或帶抑菌劑的凝膠所形成的組合病毒免疫型誘導(dǎo)劑。比如以黃芪多糖，綠原酸，丹參總酮，益母草堿為主要成分，經(jīng)添加凝膠或帶抑菌劑的凝膠所形成的組合免疫型誘導(dǎo)劑[0010] 所述的凝膠為聚丙烯酸與可溶性淀粉以質(zhì)量比為1：50-80的混合物；所述的帶抑菌劑的凝膠為聚丙烯酸、可溶性淀粉、香蘭素以質(zhì)量比為1：50-80：0.1-1，所述的聚丙烯酸還可以為聚丙烯酸鹽。\n[0011] 將上述病毒免疫型誘導(dǎo)劑或組合病毒免疫型誘導(dǎo)劑應(yīng)用于草莓脫毒種苗病毒免疫上。\n[0012] 將上述原料按重量份混合配比均勻后在草莓脫毒種苗組織培養(yǎng)的生根培養(yǎng)基配置中，添加5-15％(進(jìn)一步優(yōu)選為8.5％)的上述免疫型誘導(dǎo)劑或組合免疫型誘導(dǎo)劑。\n具體實(shí)施方式\n[0013] 實(shí)驗(yàn)例1\n[0014] 以法蘭地草莓脫毒種苗為例\n[0015] 1、按下列重量配比稱取原料(KG):黃芪多糖3.2KG、綠源酸2.6KG、丹參總酮2.6KG、益母草堿1.6KG，將上述原料混合均勻。\n[0016] 2、在草莓脫毒種苗組織培養(yǎng)的生根培養(yǎng)基配制過程中添加8.5％的上述病毒免疫誘導(dǎo)劑。\n[0017] 3、草莓莖尖或根尖脫毒法操作，在相同的環(huán)境條件下分別培養(yǎng)2000株待生根的繼代種苗，并用PCR法進(jìn)行病毒檢測確認(rèn)不帶病毒。\n[0018] 4、配制添加了免疫誘導(dǎo)劑的生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)得到1000株生根原種苗為實(shí)驗(yàn)組A。\n觀察發(fā)現(xiàn)，添加免疫誘導(dǎo)劑時(shí)草莓脫毒苗生根無影響，生根原種苗正常。\n[0019] 5、配置未添加免疫誘導(dǎo)劑的生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)得到1000株生根原種苗為對照組B。\n[0020] 6、在相同實(shí)驗(yàn)環(huán)境條件下，用實(shí)驗(yàn)室分離的草莓常見4種病毒進(jìn)行主動(dòng)感染實(shí)驗(yàn)，并用PCR法進(jìn)行病毒檢測，記錄感染情況。\n[0021] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄數(shù)據(jù)如下：\n[0022]\n[0023] 實(shí)驗(yàn)例2\n[0024] 以紅顏草莓脫毒種苗為例\n[0025] 1、按下列重量配比稱取原料(kg):黃芪多糖3.2kg、綠源酸2.6kg、丹參總酮2.6kg、益母草堿1.6kg，將上述原料混合均勻。\n[0026] 2、在草莓脫毒種苗組織培養(yǎng)的生根培養(yǎng)基配制過程中添加8.5％的上述病毒免疫誘導(dǎo)劑。\n[0027] 3、草莓莖尖或根尖脫毒法操作，在相同的環(huán)境條件下分別培養(yǎng)2000株待生根的繼代種苗，并用PCR法進(jìn)行病毒檢測確認(rèn)不帶病毒。\n[0028] 4、草莓莖尖或根尖脫毒法操作，在相同的環(huán)境條件下分別培養(yǎng)2000株待生根的繼代種苗，并用PCR法進(jìn)行病毒檢測確認(rèn)不帶病毒。\n[0029] 5、配制添加了免疫誘導(dǎo)劑的生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)得到1000株生根原種苗為實(shí)驗(yàn)組A。\n觀察發(fā)現(xiàn)，添加免疫誘導(dǎo)劑時(shí)草莓脫毒苗生根無影響，生根原種苗正常。\n[0030] 6、配置未添加免疫誘導(dǎo)劑的生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)得到1000株生根原種苗為對照組B。\n[0031] 7、在相同實(shí)驗(yàn)環(huán)境條件下，用實(shí)驗(yàn)室分離的草莓常見4種病毒進(jìn)行主動(dòng)感染實(shí)驗(yàn)，并用PCR法進(jìn)行病毒檢測，記錄感染情況。\n[0032] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄數(shù)據(jù)如下：\n[0033]\n[0034] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：在草莓脫毒種苗組培的生根培養(yǎng)基中添加本免疫誘導(dǎo)劑，能有效提高草莓脫毒種苗對病毒的抗性，對草莓斑駁病毒、皺縮病毒、鑲脈病毒具有顯效免疫力，對輕型黃邊病毒具有弱效免疫力。\n[0035] 實(shí)施例3\n[0036] 1、按下列重量配比稱取原料(kg):黃芪多糖1.8kg、魔芋葡甘聚糖1.6kg、經(jīng)滅菌后的腐殖酸3.5kg、丹參總酮1.2kg、蒲黃酮1.6kg、益母草堿1.6kg，將上述原料混合均勻。\n[0037] 2、在草莓脫毒種苗組織培養(yǎng)的生根培養(yǎng)基配制過程中添加12.5％的上述病毒免疫誘導(dǎo)劑。\n[0038] 實(shí)施例4\n[0039] 1、按下列重量配比稱取原料(kg)：白術(shù)多糖1.4kg、麻黃多糖0.8kg、女貞子多糖\n0.8kg、原兒茶酸2.6kg、三七總皂苷1.1kg、竹節(jié)皂苷1.3kg、麻黃生物堿0.6kg、茶多酚\n0.8kg，將上述原料混合均勻。\n[0040] 2、在草莓脫毒種苗組織培養(yǎng)的生根培養(yǎng)基配制過程中添加7.2％的上述病毒免疫誘導(dǎo)劑。\n[0041] 實(shí)施例5\n[0042] 1、按下列重量配比稱取原料(kg):魔芋葡甘聚糖1.75kg、香菇多糖1.4kg、表沒食子酸3.4kg、益母草堿1.6kg、麻黃生物堿0.3kg、丹參總酮3.2kg，將上述原料混合均勻。\n[0043] 將上述組分混合均勻后，均勻分散于聚丙烯酸、可溶性淀粉、香蘭素以質(zhì)量比為1:\n75:0.5的混合物中即成組合病毒免疫型誘導(dǎo)劑。\n[0044] 2、在草莓脫毒種苗組織培養(yǎng)的生根培養(yǎng)基配制過程中添加10.5％的上述組合病毒免疫誘導(dǎo)劑。